薄層色譜成像系統

2022-09-02 15:06:37    admin11605

導語：適用于中醫學、中藥學、藥檢所、疾控中心等領域，快速對薄層色譜成像

薄層色譜法是一種基于混合物組分在固定相和流動相之間的不均勻分配或保留而將其分離的方法。與HPLC不同，TLC將固定相涂鋪在栽板上，使之形成均勻的薄層。被分離的樣品溶液點加在薄層板下沿的位置，再把下沿向下放入盛有流動相（深度5mm）的密缸中，進行色譜展開，實現混合組分分離。將被展開的組分斑點即色譜譜帶，通過適當技術對色譜譜帶進行處理可得到定性和定量的檢測結果。

它保持了操作方便、設備簡單、顯色容易等特點，同時展開速率快，一般僅需15～20分鐘；混合物易分離，分辨力一般比以往的紙層析高10～100倍，它既適用于只有0．01μg的樣品分離，又能分離大于500mg的樣品作制備用，而且還可以使用如濃硫酸、濃鹽酸之類的腐蝕性顯色劑。

操作方便只需把薄層板放入儀器中，選擇需要的照明模式，幾秒總就可以自動獲得大小與薄層板一致的最佳圖像。儀器功能按照人體工程學設計，操作快捷可靠；

操作流程：

（1）取樣：直接從原溶液中取樣以檢測反應情況，根據反應液性質選擇合適的溶劑，如水等，大達到完全溶解的狀態后即可進行點樣。其他與反應物有關的原料、中間產物應該再取樣品前配置好，要注意保持各配置好的待點樣溶液濃度接近，否則濃稀差異太大影響最后的分析判斷。

（2）點樣：用毛細管或玻璃點樣于薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊1.0~1.5cm，點樣直徑一般不大于3mm，最好控制在2mm左右，點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜，適當靠近。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。

（3）展開：將點好樣品的薄層板晾干，最好室溫下自然蒸發干；放入盛有展開劑的展開缸中，浸入展開劑的深度為距原點5mm為宜；密封，展開至所需要距離；一般展開距離8~15cm，但應該根據試劑情況確定，但是一般不低于4cm，取出薄層板。

展開杠如需預先用展開擠預平衡，可在缸中加入適量的展開劑，搖晃至展開四壁均勻涂布后，倒掉，重新加入展開劑。必要時并在壁上貼二條與缸同樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開劑中，蓋嚴，使展開缸平衡。

（4）檢測：對于有顏色的物質可在展開過程中直接觀察，判斷反應情況，根據試劑需要選擇展開距離。對于無色物質，將展開到所需要距離時取出硅膠板，直接再紫外燈下觀測，或者待晾干后在紫外燈下觀測。

實驗結果：

           

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